Vigilância laboratorial de COVID-19 e outros vírus respiratórios no DF: integração do controle de qualidade pela análise de dados de RT-PCR

Resumo

INTRODUÇÃO: No Distrito Federal (DF), a elevada incidência de infecções respiratórias agudas gera pressão considerável sobre os serviços de saúde e impacta a população, tornando essenciais o diagnóstico ágil e ações de controle eficazes. Os testes de RT-PCR, "padrão-ouro" no diagnóstico, para múltiplos Vírus Respiratórios (VRs) como: Influenza A (FluA); Influenza B (FluB); o SARS-CoV-2 (COVID-19); Adenovírus (ADV); Rinovírus (HRV) e Vírus Sincicial Respiratório (VSR/VRS) é essencial, mas sua efetividade depende da integridade de toda a cadeia processual, desde a coleta da amostra até a interpretação do resultado. Erros em qualquer fase, desde a coleta inadequada até falhas na amplificação ou interpretação, podem comprometer a fidedignidade dos dados. Dessa forma, todas as etapas deste processo devem ser constantemente monitoradas e padronizadas, evitando erros. Este estudo visa gerar evidências para otimizar esse processo na Rede Pública de Saúde do DF, integrando o controle de qualidade laboratorial com a análise aprofundada dos dados de RT PCR e seu contexto, fortalecendo a tomada de decisão baseada em dados confiáveis. OBJETIVOS: Fortalecer a VLE de COVID-19 e outros VRs na rede pública do DF através da integração do controle de qualidade (CQ) pela análise de dados de RT-PCR, com os seguintes objetivos: Avaliar a qualidade amostral utilizando o gene controle RP; 2) Monitorar os controles de RT-PCR; 3) Analisar os valores de CT dos alvos virais como ferramenta para verificação de interpretação clínica; 4) Utilizar os dados de CQ derivados da RT-PCR para otimizar as etapas críticas no fluxo da vigilância laboratorial. MÉTODO: Visando fortalecer a vigilância de VRs no Distrito Federal, realizamos um estudo observacional analítico focado na integração do controle de qualidade (CQ) por meio da análise criteriosa dos dados de RT-PCR. Investigamos os resultados do Painel Respiratório Viral (VRs citados) processados no LACEN-DF, oriundos de mapas de trabalho completos de abril de 2025, selecionados aleatoriamente para garantir representatividade. A avaliação do CQ foram derivados diretamente dos dados da RT-PCR: a análise do gene controle endógeno RNase P (RP) serviu para verificar a qualidade da amostra e da extração genômica, etapa crucial para resultados fidedignos; controles positivo e negativo validaram cada corrida analítica; e a análise dos valores de CT dos vírus detectados auxiliou na caracterização do perfil epidemiológico. Todos os resultados foram tratados de forma segura e anonimizada. Para compreender o processo em sua realidade prática, mapeamos o fluxo de trabalho no laboratório – desde a coleta da amostra até a emissão final do laudo. Esse mapeamento visou identificar fontes potenciais de erro e os pontos críticos do exame. A análise dos dados quantitativos (médias e desvios padrão dos CTs) empregou estatística descritiva. O propósito desta abordagem metodológica é gerar subsídios baseados em evidências para o aprimoramento contínuo dos processos, fortalecendo assim a robustez da vigilância laboratorial de vírus respiratórios no DF. RESULTADOS: A análise dos dados de 150 amostras de pacientes (2 mapas de trabalho) mostrou ser sólida e confiável para a VLE, indicando consistência nos principais pontos de CQ avaliados neste estudo. A segurança dos dados de VLE foi a demonstração da qualidade das amostras recebidas e processadas: observamos 100% de detecção de RP, com valor médio de CT de 25,0 (DP ±2,6), que é relevante por assegurar a representatividade do material biológico e a eficiência da coleta da amostra naso-faríngea e etapa de extração, minimizando assim o risco de subnotificação por resultados falso-negativos que poderiam comprometer a precisão da VLE. Os controles positivo e negativo, incluídos como padrão em todas as corridas analíticas apresentaram os resultados esperados, confirmando a validade técnica de cada ensaio e a confiabilidade na detecção (ou não detecção) dos alvos virais em cada amostra. O mapeamento do fluxo de trabalho permite identificar etapas críticas – como o transporte de amostras e a triagem inicial no laboratório. Finalmente, a estratificação dos valores de CT dos vírus detectados (positividade de 65% nos mapas analisados) pode indicar: alta, média ou baixa carga viral; e que pode vir a ser um parâmetro valioso e informativo no laudo. Essa análise agrega uma dimensão semi-quantitativa aos dados da VLE, que pode auxiliar na interpretação da dinâmica e intensidade de transmissão viral na comunidade aprimorando a segurança e a qualidade final do processo laboratorial. DISCUSSÃO E CONCLUSÕES: A integração do CQ pela análise dos dados da rotina de RT-PCR demonstra ser uma estratégia segura na VLE de Covid-19 e outros VRs. A análise conjunta de indicadores chave – como o gene RP para atestar a qualidade amostral, os controles que validam a execução analítica, e a distribuição dos valores de CT que oferece indicativos epidemiológicos e de coerência dos resultados, quando contextualizada pelo mapeamento dos processos do serviço, cria um sistema de CQ mais seguro, dinâmico e informativo. Embora esta análise represente um retrato do período de abril de 2025, os achados reforçam que tal abordagem integrada, alimentada pelos próprios dados laboratoriais, fortalece substancialmente a qualidade e a credibilidade da VLE de Covid-19 e outros VRs na Rede Pública do DF. Informações mais seguras e úteis são essenciais para subsidiar decisões e ações de Saúde Pública mais eficazes e adequadas ao nosso contexto local, contribui para respostas mais efetivas na VLE das doenças respiratórias.